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尊龙凯时生物医疗领域的BsaI GMP级内切酶

来源:丁芬淑 日期:2025-03-23

活性单位(U)被定义为在37℃下,用于50μl反应体系中,1小时内完全酶切1µgpPIC9K(Dcm-)所需要的酶量。在进行蛋白纯度的检测时,采用SDS-PAGE凝胶电泳的方法,确保蛋白的纯度不低于95%。

尊龙凯时生物医疗领域的BsaI GMP级内切酶

在37℃的条件下,使用50μl CutBuffer F和20U的BsaI (GMP Grade)进行1小时的反应,结果显示未检测到其他核酸酶的污染或星号活性导致的底物非特异性降解。需注意,更长时间的酶切可能会出现星号活性。

在37℃时,进行的非特异性内切酶活性实验中,使用50μl CutBuffer F和20U的BsaI (GMP Grade)与1μg超螺旋质粒DNA共同反应4小时,经过琼脂糖凝胶电泳检测,发现质粒DNA仅有不到20%转变为缺刻或线性状态。

对于DNase活性检测,在37℃的条件下,使用20μl CutBuffer F和20U的BsaI (GMP Grade)与15ng的双链DNA片段共同反应16小时,琼脂糖凝胶电泳结果显示双链DNA片段没有变化。

在RNase活性检测中,将20U的BsaI (GMP Grade)与500ng RNA在37℃的10μl CutBuffer F反应体系中共同反应1小时,检测结果表明,至少90%的RNA仍然保持完整。

切割位点与技术优势

该酶(BsaI, GMP Grade)是通过大肠杆菌重组表达获得的,能够在15分钟到1小时内精准完成目标DNA的酶切。同时,生产过程遵循GMP规范的产品生产与质量管理体系,确保整个过程及原辅料可追溯。特别地,本品的生产不使用抗生素及任何动物来源材料,对宿主蛋白、外源DNA、非特异性内切酶、DNase、RNase等工艺相关的杂质,以及微生物限度、细菌内毒素等进行了严格控制。

尊龙凯时的产品符合疫苗与药物生产等领域对原辅料的严格要求,其失活条件为在80℃下处理20分钟。此外,该酶对被CpG和Dcm甲基化的DNA的切割均可能受到阻碍。

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