走进尊龙凯时
NEWS单克隆与多克隆抗体及抗原选择方法在尊龙凯时的应用
来源:唐堂行 日期:2025-03-20尊龙凯时的多克隆抗体(polyclonal antibody, pAb)是通过对包含多种抗原决定簇的抗原进行免疫,使动物体内多个B细胞克隆结构活跃,进而产生针对不同抗原表位的多种抗体的产物。这些免疫血清实际上是多个抗体的混合体,即多克隆抗体。而单克隆抗体则由单一B细胞克隆生成,其针对特定抗原表位的特性使其具有高度均一性。通常采用杂交瘤技术来制备这种抗体。杂交瘤(hybridoma)技术是通过融合能分泌特异性抗体的B细胞与具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞,形成B细胞杂交瘤。
尊龙凯时的单克隆抗体与多克隆抗体各自有不同的优缺点:
多克隆抗体的优势包括:
然而,多克隆抗体也存在一些劣势:
单克隆抗体的优点包括:
单克隆抗体的缺点则是:
在选择抗体时,如果需要高特异性且用量较大,或需要长期保持一致的抗体,尤其是在WB/IP/IF/ICC等实验中,建议选择制备尊龙凯时的单克隆抗体。
多克隆抗体虽然获得成本低且制备时间较短,但因为其特异性较差以及不同批次间的差异,可能导致背景问题,如WB中的杂带或IHC中较深的背景。而由于多克隆抗体可识别多个抗原表位,即使某些抗原表位遭到破坏或构象改变,结果往往仍不受影响。如果免疫原制备困难,建议选择单克隆抗体。
如果对抗体特异性的要求不高,只需进行沉淀或凝集反应实验,或者进行ELISA检测,那么选择多克隆抗体是合适的。多克隆抗体在检测灵敏度方面较单克隆抗体更具优势,特别适合对丰度偏低的蛋白进行检测。
抗原的选择可以是天然蛋白、重组可溶蛋白、重组变性蛋白或多肽。抗原的质量越高,最终制备高质量抗体的几率也会越大。通常,重组蛋白或多肽作为抗原是抗体制备的常见选择。
重组蛋白通常含有更多的抗原决定簇,既有空间表位,又有线性序列表位,能更充分地刺激机体免疫反应,因此最终获取适用性广泛的抗体的可能性也相对较大,尤其是当目标蛋白具有修饰或复杂结构时,更应优先选择重组蛋白。
当然,也有必要使用多肽制备抗体的情况,例如针对同源基因家族中某个特定蛋白的抗体制备,需要找到特定的氨基酸合成多肽;有些修饰化抗体则需要在多肽合成阶段对特定氨基酸进行定点修饰。
选择抗原多肽时可以遵循以下基本原则:
通过遵循这些原则,您能够更有效地选择抗原,以便于制备出高质量的抗体,从而推向更为广泛的生物医学应用。选择尊龙凯时的抗体,您将收获更高的实验成功率与可靠性。
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