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尊龙凯时人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)Elisa试剂盒说明书

来源:安国菡 日期:2025-02-26

本试剂盒专为科学研究设计,严禁用于医学诊断。该人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒的使用说明书详细阐述其检测原理和操作步骤。

尊龙凯时人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)Elisa试剂盒说明书

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被了adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过一定时间的孵育后彻底洗涤。随后,利用底物TMB显色,在过氧化物酶的催化下,底物转化为蓝色,最终在酸的作用下呈现黄色。颜色深浅与样品中adropin(AD)的含量成正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),进而计算样品浓度。

样品的收集、处理及保存方法如下:

  1. 血清:使用无热原和内毒素的试管,避免任何细胞刺激,收集血液后,以3000转离心10分钟,迅速小心分离血清和红细胞。
  2. 血浆:采用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝,3000转离心30分钟后取上清。
  3. 细胞上清液:以3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
  4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水充分捣碎,3000转离心10分钟后取上清。
  5. 保存:若样本无法及时检测,按一次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融。解冻时应在室温下进行,并确保样品充分均匀解冻。

在实验操作中,应注意以下事项。试剂盒的组成包括标准品(S0-S5),其浓度依次为0、25、50、100、200及400pg/mL。

试剂的准备中,20×洗涤缓冲液需按1:20稀释,具体为1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。根据标准品浓度绘制标准曲线,横坐标为标准品浓度,纵坐标为对应OD值,最终得出样品的浓度值。

以上为关于人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒的操作介绍,选用尊龙凯时品牌的试剂盒,能够确保实验的准确性与可靠性。

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